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醫(yī)療動(dòng)態(tài)
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生化分析儀試劑空白監(jiān)測(cè)參數(shù)如何設(shè)置？
生化分析儀試劑空白監(jiān)測(cè)參數(shù)如何設(shè)置？
加入時(shí)間：2014-05-14 15:40:50 當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率：3320
生化分析儀在檢測(cè)前，無樣品或以水代替樣品在反應(yīng)過程中觀察試劑空白值或其變化情況，主要用于監(jiān)測(cè)試劑質(zhì)量及醫(yī)療設(shè)備的穩(wěn)定性，利用試劑空白對(duì)試劑本身或反應(yīng)漂移引起的誤差進(jìn)行補(bǔ)償，用以校正△A或△A/min。它與測(cè)定波長(zhǎng)、光徑大小、不同試劑及配方和樣品試劑比例等有關(guān)，不能盲目套用，必要時(shí)宜實(shí)際測(cè)定。
1．試劑吸光度上限和下限定點(diǎn)監(jiān)測(cè)試劑的吸光度。它常用規(guī)定波長(zhǎng)及光徑下的吸光度值表示。儀器的試劑空白檢測(cè)點(diǎn)因儀器和測(cè)定方法的不同而有差異。終點(diǎn)法常在PO點(diǎn)讀數(shù)，連續(xù)監(jiān)測(cè)法常以反應(yīng)監(jiān)測(cè)起始點(diǎn)來判讀。儀器在試劑空白檢測(cè)及相關(guān)的校準(zhǔn)測(cè)定時(shí)，若監(jiān)測(cè)到超過此參數(shù)的限值，則提示試劑失效或校準(zhǔn)無效。反應(yīng)吸光度向上的試驗(yàn)取上限值：如Trinder反應(yīng)以酚或2-羥-3，5-二氯苯磺酸等和4-氨基安替比林作用，生成紅色色素，試劑有一定的自發(fā)氧化，其試劑一般要求試劑吸光度上限≤0. 1-0. 4。以結(jié)合型硝基苯衍生物作為底物的ALP和GGT常要求≤0.6~0.8。反應(yīng)吸光度向下的試驗(yàn)取下限值：如以NADH或NADPH為輔酶的ALT和Urea(紫外法)等試驗(yàn)，一般要求試劑吸光度下限≥1．0。
2．試劑空白速率顧名思義，它是在反應(yīng)過程中對(duì)試劑空白的變化速率作連續(xù)監(jiān)測(cè)，其數(shù)值在樣品測(cè)定結(jié)果中自動(dòng)扣除。試劑中可能混有的其他雜酶或干擾物對(duì)試劑空白速率有影響。在酶促反應(yīng)中，試劑空白速率也是試劑在監(jiān)測(cè)過程中底物自發(fā)降解的結(jié)果。底物為還原型輔酶者，本身不穩(wěn)定而分解，多呈下降趨勢(shì)；以硝基苯酚或苯胺的衍生物作底物，在堿性環(huán)境中自發(fā)水解成被測(cè)物質(zhì)，多呈上升趨勢(shì)。此參數(shù)主要用于連續(xù)監(jiān)測(cè)法。一般認(rèn)為酶活性測(cè)定的試劑空白速率(△A/min)應(yīng)≤0. 001~0.003。由于試劑空白速率與儀器檢測(cè)下限、正常參考范圍下限等指標(biāo)有關(guān)，有時(shí)也以濃度單位表示。要根據(jù)K值、儀器穩(wěn)定性、方法允許變異而定。例如，ALT或AST40U/L以下活力濃度的分析誤差應(yīng)≤10％，其試劑空白速率應(yīng)≤4．0U／L。一些儀器的程序參數(shù)中沒有此參數(shù)，但我們應(yīng)在試劑空白的測(cè)定資料中關(guān)注它，若資料波動(dòng)大，須查找試劑或儀器原因。
3．試劑空白的日常監(jiān)測(cè)測(cè)定方法設(shè)置了試劑空白的項(xiàng)目，都要先行作試劑空白測(cè)定，在樣品測(cè)定計(jì)算中自動(dòng)扣除。由于試劑空白不是在每一個(gè)樣品測(cè)定中實(shí)時(shí)測(cè)定并扣除，當(dāng)樣品測(cè)定中試劑的變化在未達(dá)到參數(shù)設(shè)置限值時(shí)不易發(fā)現(xiàn)，試劑空白扣除會(huì)產(chǎn)生誤差。所以，應(yīng)根據(jù)試劑的穩(wěn)定性確定試劑空白及相關(guān)的校準(zhǔn)的測(cè)定頻率。連續(xù)監(jiān)測(cè)法的試劑應(yīng)每天(尤其在換另瓶或另批號(hào)試劑時(shí))常規(guī)測(cè)定此參數(shù)。對(duì)樣品的異常結(jié)果．也應(yīng)及時(shí)對(duì)其測(cè)定吸光度資料(包括與試劑空白有關(guān)的資料，例如PO點(diǎn)讀數(shù))觀察分析。
4.有的半自動(dòng)生化儀沒有試劑吸光度上限和下限設(shè)定，但一般在測(cè)定屏幕都顯示初始吸光度值，應(yīng)人工加以判斷。酶活力測(cè)定結(jié)果呈負(fù)值，有時(shí)可能與試劑空白錯(cuò)誤有關(guān)。
5．試劑吸光度上限和下限不是試劑質(zhì)量的唯一指針。因此，一定的校準(zhǔn)頻率和室內(nèi)質(zhì)控是質(zhì)量保證的必需手段。我們?cè)趯?shí)際工作中就遇到酶活力測(cè)定的試劑空白數(shù)據(jù)在規(guī)定限值內(nèi)，但質(zhì)控物測(cè)定結(jié)果連續(xù)偏低，病人結(jié)果因每天標(biāo)本少而難以判斷，最后發(fā)現(xiàn)是試劑質(zhì)量下降。
