國產(chǎn)全自動生化分析儀波長的選擇
加入時間：2014-05-14 15:48:33 當前新聞點擊率：2498
全自動生化分析儀-波長（Wave 1ength)的正確選擇有利于提高測定的靈敏度和減少測定誤差。全自動生化分析儀光度學方法有單波長和雙波長之分，有的醫(yī)療設備可用三波長、甚至多波長，以及兩波長比率等。有的醫(yī)療設備可作導數(shù)光譜分析。單波長測定易受樣品溶血、黃疸、脂濁等因素干擾。雙波長測定可以通過副波長加以修正，減少甚至消除干擾因素，提高測定準確性。采用同光束雙波長，亦有利于排除光源強度變化對結(jié)果的影響。
測定波長選擇有三個主要條件：
(1)待測物質(zhì)在該波長下的光吸收最大。
(2)其吸收峰宜較寬而鈍，而不是處于尖峰或陡肩，一般不選光譜中的末端吸收峰，換句話說，該吸收峰處的吸光度隨波長變化較小。
(3)常見干擾物在該波長下的光吸收最小。試劑盒說明一般已提供波長參數(shù)。實際波長選擇需要了解待測物質(zhì)和干擾組分對不同波長單色光的吸收程度，即以波長為橫坐標、吸光度為縱坐標作吸收光譜曲線(光吸收曲線)。
采用透射免疫比濁法，免疫復合物大小約35~100mn之間，于波長290~410nm下有最大吸收峰，常取340nm；如用膠乳增強免疫濁度法，理想的檢測波長可增至可見光區(qū)。
連續(xù)監(jiān)測法中，要注意雙波長測定有兩種類型的機型：主波長全程監(jiān)測副波長單點監(jiān)測，和雙波長全程監(jiān)測。不僅因為后者的準確性優(yōu)于前者，而且因為酶活性測定的K值計算與波長及摩爾吸光系數(shù)有關(guān)，更顯重要。
副波長單點監(jiān)測：試劑和樣品混合后，雙波長只測一點，此后只用主波長連續(xù)監(jiān)測；計算時，全部x主吸光度值均減去同一λ副吸光度值。K值計算代入主波長摩爾吸光系數(shù)即可。機型如Monarch 1000 ，Technicon RA 1000等。
雙波長全程監(jiān)測：全程每～測定點均用雙波長同測，并各自用λ主吸光度值減去λ副吸光度值。因為所測指示酶或產(chǎn)物在λ副波長時也存在一定的吸光系數(shù)，K值計算代入的摩爾吸光系數(shù)值應采用ε主減去ε副。如NADH的ε 為6．22×10 ， 為1．33×10 ，ALP產(chǎn)物ε 為18.5x×10 ，ε 為0.2×10 很??；GGT產(chǎn)物在副波長處無吸光系數(shù)。
