生化分析儀樣品量、試劑量與稀釋量的配比
加入時間:2014-05-22 15:55:53 當前新聞點擊率:2482
有關醫(yī)療設備參數(shù)包括樣品量、試劑量、稀釋水量、最小反應體積和最大比色杯容量等。如HITACHI7170反應體積180~380µl,最大體積570µ l。BT 224半自動生化分析儀活動比色池容積33µl,吸液量200~990µl,最適體積500µl。下面普朗小編給大家做個詳細介紹:
1.最小反應體積 在儀器光度讀數(shù)要用于結(jié)果計算時,反應液液面高度不低于光度計光徑的最小體積。它保證儀器的正確讀數(shù)和計算,也是儀器測定精度和經(jīng)濟性的指針之一。在有的儀器中,它以反應體積的下限表示,有的則專門標明最小反應體積。在單試劑測定中,樣品與試劑的總體積不得少于此參數(shù)。在雙試劑測定中,若R1與樣品的反應讀數(shù)不納進結(jié)果計算。R1自勺加液量可不考慮此參數(shù),如連續(xù)監(jiān)測法;否則應考慮它對結(jié)果的影響,如終點法在加R2之前讀數(shù),并以此來扣除試劑或樣品空缺時。
在半自動生化儀中,最適吸人量相當于最少反應體積。它與進液管道長度、活動比色池容積,吸液泵抽吸力大小和液體黏稠度有關,它要保證光度檢測不受空泡和前后樣品攜帶污染的干擾。因此,吸人體積不能任意降低,必要時,應加大反應液量和吸人量。
2.最大比色杯容量 這個參數(shù)含義明確。在有的儀器中,它以反應體積的上限表示,有的則專門標明最大比色杯容量。反應液超過此體積,將致液體外溢,儀器測定系統(tǒng)被污損。
3.樣品試劑比例樣品與試劑的比例(SV:RV),也可表示為樣品體積分數(shù)——樣品體積與反應液總體積的比值(SV/TV),是方法學基本參數(shù)。酶活力測定中,樣品在總體積中的比例應在10%以下。一般來說,待測物質(zhì)在樣品中含量低的、生理波動范圍大的,樣品用量較大。如Trinder反應測定血清葡萄糖、膽固醇等,樣品試劑比例多為1:1OO,測定血尿酸或高密度脂蛋白膽固醇,常增加為1:50;ALT和AST的樣品試劑比例多為1:1O至1:20。方法靈敏、吸光度高的實驗方法,樣品試劑比例小,如白蛋白BCG法,樣品試劑比例常為1:200。肌酐Jaffe氏法監(jiān)測時間短、吸光度值較低,樣品試劑比例多為1:10。一般應以試劑說明為準,不宜輕易改動。
改動樣品試劑比例,影響一系列方法學參數(shù)。若比例增大,則線性范圍縮小,線性反應時間縮短,樣品內(nèi)源性干擾、基質(zhì)效應增加、旁路反應會增強,方法特異性也下降。若比例減少,檢測信號偏低,信噪比(噪音/信號)增大,當儀器精度不高時,會加大丈量誤差。