試劑及方法學在生化分析儀中的應(yīng)用
加入時間：2014-05-14 11:34:36 當前新聞點擊率：2472
生化分析儀目前在我國的應(yīng)用已經(jīng)非常廣泛，但不少人對其相關(guān)知識了解的并不多，導致在操作過程中產(chǎn)生不少誤會，縮短了醫(yī)療設(shè)備的使用壽命。下面普朗小編給大家詳細介紹下試劑及方法學在生化分析儀中的應(yīng)用，讓大家對生化分析儀有更多的認識：
試劑組成在酶活性的連續(xù)監(jiān)測法時，若試劑含工具酶數(shù)量多、偶聯(lián)反應(yīng)多，則激活反應(yīng)時間一般較長，延遲時間也較長，如肌酸激酶(NAC法)延遲時間常設(shè)置120-180秒；若試劑中底物經(jīng)待測酶催化，其產(chǎn)物可以直接測定的，則延遲時間較短，如 -谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)設(shè)定30-60秒。同一項目同一方法，但試劑配方不同，其反應(yīng)快慢等特征也可能不同，如白蛋白測定。白蛋白與溴甲酚綠(BCG)為即時反應(yīng)，10秒鐘內(nèi)已完成，其后球蛋白等也將與BCG發(fā)生反應(yīng)，所以孵育時間不能延長。但在同一測定時間，BcG濃度、緩沖液種類、pH和表面活性劑不J司的試劑，測定結(jié)果可能差異明顯。
樣品異常成分干擾有的試驗項目需要用工具酶將內(nèi)源性代謝產(chǎn)物耗盡，比如丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性測定試劑中須有足量的乳酸脫氫酶(LDH)。如果使用單試劑，正常血清樣品延遲時間60秒即可；但當內(nèi)源性酮酸增多(如酮癥酸中毒)時，試劑內(nèi)LDH常常不能在60秒內(nèi)完全將其清除，剩余酮酸會進入監(jiān)測期干擾測定，使測定結(jié)果偏高，所以延遲時間應(yīng)增至90～120秒。采用雙試劑，則可在加入R1后即進入預(yù)孵育期。
方法學要求比如肌酐(Jaffe法)測定的特異性不強，一般認為反應(yīng)前20秒左右為乙酰乙酸等快反應(yīng)干擾物呈色，后約80～100秒為蛋白質(zhì)等慢反應(yīng)假肌酐呈色，20~60秒肌酐呈色反應(yīng)占主導地位。采用兩點法或速率法可減少干擾，但具體取多長的延遲時間，應(yīng)根據(jù)試劑和儀器讀數(shù)特點，以干擾試驗等方法來評價決定。
工作程序，要在保證準確性的前提下，合理設(shè)置參數(shù)，提高工作效率。最突出的例子是半自動生化儀上酶活性連續(xù)監(jiān)測法的延遲時間設(shè)定。由于只能單份樣品逐一測定，若延遲時問全部設(shè)置在儀器內(nèi)，每個延遲時間加監(jiān)測時間至少1分鐘以上，守候時間較長。工作量大時，可以根據(jù)儀器控溫、加樣及讀數(shù)和試劑特點，以及室溫情況，將延遲時問挪一部分到機外，套式操作，但要確保機內(nèi)延遲時間不要進入線性反應(yīng)期。
