生化分析儀檢測原理復(fù)雜嗎,是什么?
加入時(shí)間:2014-05-04 16:32:20 當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率:2346
面對(duì)繁多而復(fù)雜的生命物質(zhì)如何進(jìn)行檢測?這就是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的目的所在。幾乎所有的生命物質(zhì)都不能直觀地被檢測出來,需要直接或間接借助于不同的技術(shù)和手段。隨著科學(xué)的發(fā)展,越來越多的技術(shù)和方法被應(yīng)用于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)。比如光度法、電位分析法、電泳技術(shù)、層析技術(shù)等在生化分析儀中就有著很好的應(yīng)用。也正是通過這些檢測方法使得越來越多的醫(yī)療設(shè)備檢測項(xiàng)目得以實(shí)現(xiàn),下面給大家一一介紹:
一、光度法
臨床檢驗(yàn)中常利用發(fā)射光譜或吸收光譜的強(qiáng)度來測定體液或組織中某一成分的含量,這類分析方法統(tǒng)稱光度法。其中,應(yīng)用吸收光譜原理進(jìn)行分析的有可見光分光光度法、紫外光分光光度法、紅外光分光光度法和原子吸收分光光度法。應(yīng)用發(fā)射光譜原理進(jìn)行分析的有火焰光度法、熒光光度法和化學(xué)發(fā)光法。臨床檢驗(yàn)中有時(shí)用到的比濁法,除了光的吸收外還有光的散射因素。目前的生化分析儀僅僅是一種利用分光光度計(jì)技術(shù),輔以簡單的控制和計(jì)算手段來達(dá)到醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)?zāi)康摹?
二、光吸收基本定律
光吸收基本定律即朗伯-比爾(Lambert-beer),公式為:A=KCL,其中吸光度A=-lg(I/I0),I0為進(jìn)射光強(qiáng)度,I為出射光強(qiáng)度,L為比色池厚度。假如濃度以mol/L為單位,液層厚度以cm為單位,此時(shí)的K稱為摩爾消光系數(shù),用ε表示。其意義是1摩爾濃度的溶液在厚度為1cm時(shí)的吸光度。不同物質(zhì)的摩爾消光系數(shù)不同。ε越大,表示該物質(zhì)對(duì)某波長光的吸收能力越強(qiáng)??梢娪绊懳舛鹊闹饕蛩赜腥N,即濃度、光程及波長。在光程及波長都不變的情況下,吸光度就只與濃度有關(guān)了。
三、實(shí)驗(yàn)方法
光譜技術(shù)中的可見、紫外吸收光譜法是各類生化分析儀對(duì)反應(yīng)過程所應(yīng)用的分析原理,即都是通過檢測一定波長下某一發(fā)色基團(tuán)吸光度的變化,輔以微機(jī)軟件系統(tǒng)的計(jì)算而完成的??梢?、紫外吸收光譜法是根據(jù)物質(zhì)分子對(duì)于200-700nm光區(qū)電磁輻射的吸收特性進(jìn)行分析的方法。可見、紫外吸收光譜法定量測定試樣中一個(gè)或幾個(gè)組份含量的基礎(chǔ)是Lambert-Beer定律。該定律是說明吸光物質(zhì)對(duì)單色光吸收的強(qiáng)弱與該物質(zhì)的濃度之間的關(guān)系。定律經(jīng)數(shù)學(xué)推導(dǎo)可表達(dá)為:A=-lgT=εCL,式中:ε-吸光系數(shù),在給定條件下為物質(zhì)的特性常數(shù);T-透光率,C-待測物濃度,L-比色池厚度。該式說明了吸光度與濃度之間的簡單正比關(guān)系。
生化分析儀就是利用光吸收的基本定律來檢驗(yàn)各種溶液的濃度指標(biāo)的一種分析儀器。在光路設(shè)計(jì)方面,有前分光和后分光兩種。所謂前分光,是指在光源燈和樣品之間用濾光片、棱鏡或光柵進(jìn)行波長選擇,取得與樣品“互補(bǔ)”的單色光之后,照射到樣品上,再用一個(gè)光電池或光電管作為檢測器,測定樣品對(duì)單色光的吸收量(吸光度)。而后分光則是將一束白光(混色光)先照到樣品上,然后再分光。