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醫(yī)療動(dòng)態(tài)
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市場(chǎng)常規(guī)生化分析儀檢測(cè)方法有哪些？
市場(chǎng)常規(guī)生化分析儀檢測(cè)方法有哪些？
加入時(shí)間：2014-05-04 16:10:59 當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率：2015
在生化分析儀檢測(cè)過(guò)程中，由于待測(cè)樣品與試劑反應(yīng)的性質(zhì)不同，所使用的信號(hào)采集方法也有所不同?？偟臍w納起來(lái)有終點(diǎn)法、動(dòng)態(tài)法和兩點(diǎn)法這三種，為使大家對(duì)此有個(gè)清晰的了解，下面特對(duì)這三種方法進(jìn)行一個(gè)詳細(xì)的介紹：
1、終點(diǎn)法：指經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的反應(yīng)，反應(yīng)達(dá)到平衡，反應(yīng)液的吸光度不再變化，只與被測(cè)物的濃度有關(guān)。這類(lèi)方法通常稱(chēng)為“終點(diǎn)”法。通過(guò)醫(yī)療設(shè)備實(shí)驗(yàn)證實(shí)，有色物質(zhì)溶液的顏色深度與其濃度有關(guān)。溶液的濃度越大，則所顯示的顏色越深。所以在比色分析中必須選擇合適的顯色條件和比色條件。顯色條件的選擇一般應(yīng)嚴(yán)格按照試劑單的要求進(jìn)行。比色條件的選擇主要是選擇合適的濾光片。即濾光片透光率最大的光波應(yīng)當(dāng)是溶液透光率最小的光波，也就是說(shuō)濾光片的顏色與溶液的顏色互為補(bǔ)色，由于有色溶液對(duì)它的互補(bǔ)色具有最大的吸收。
還有個(gè)別的生化項(xiàng)目，有干擾成分存在。為了消除實(shí)驗(yàn)的干擾，采用雙波上進(jìn)行丈量。此方法的關(guān)鍵是如何選擇二個(gè)測(cè)定波長(zhǎng)λ1和λ2。選擇的原則是：使干擾組份在這兩個(gè)波優(yōu)點(diǎn)的吸光系數(shù)相等，而待測(cè)組份在這兩個(gè)波優(yōu)點(diǎn)吸光系數(shù)有明顯的差別。
2、動(dòng)力學(xué)法：又稱(chēng)零級(jí)動(dòng)力學(xué)法，指反應(yīng)速度與底物濃度的零次方成正比，也就是與底物濃度無(wú)關(guān)。因此，在整個(gè)反應(yīng)過(guò)程中，反應(yīng)物可以勻速地天生某個(gè)產(chǎn)物，導(dǎo)致被測(cè)定溶液在某一波長(zhǎng)下吸光度均勻地減小或增加，減小或增加的速度(ΔA/min)與被測(cè)物的活性或濃度成正比。動(dòng)力學(xué)法也被稱(chēng)為連續(xù)監(jiān)測(cè)法或速率法；主要用于酶活性的測(cè)定。酶是由生物體產(chǎn)生并能在體內(nèi)外起催化作用的一類(lèi)特殊蛋白質(zhì)，體內(nèi)幾乎所有的代謝反應(yīng)都是在不同的酶催化下進(jìn)行的。酶的催化效率很高，而且非常不穩(wěn)定。人體內(nèi)酶濃度的變化能反映出很多疾病。同時(shí)酶的含量又很低，除免疫學(xué)方法外，不能直接測(cè)定其含量，只能測(cè)其催化反應(yīng)過(guò)程中一定時(shí)間內(nèi)物質(zhì)變化的量，即酶促反應(yīng)的速率，或稱(chēng)酶的活力。通過(guò)測(cè)定底物濃度的下降或產(chǎn)物濃度的上升，可以追蹤酶促的反應(yīng)過(guò)程中底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的過(guò)程。酶促反應(yīng)過(guò)程可分為幾個(gè)時(shí)期?；瘜W(xué)反應(yīng)的初始階段，底物和產(chǎn)物的變化不明顯，此期在幾秒到幾分鐘，稱(chēng)為延遲期；隨后是底物和產(chǎn)物變化與時(shí)間成直線的時(shí)期，形成產(chǎn)物的速率恒定，稱(chēng)為零級(jí)反應(yīng)期；接著是反應(yīng)速率持續(xù)下降，進(jìn)進(jìn)一級(jí)反應(yīng)期。
3、固定時(shí)間法：又稱(chēng)為一級(jí)動(dòng)力學(xué)法、二點(diǎn)動(dòng)力學(xué)法等，屬于帶標(biāo)準(zhǔn)的速率法，是動(dòng)態(tài)法的另一種形式。指在一定的反應(yīng)時(shí)間內(nèi)，反應(yīng)速度與底物濃度的一次方成正比，即v=k[S]。由于底物在不斷的消耗，因此整個(gè)反應(yīng)速度在不斷的減小，表現(xiàn)為吸光度的變化越來(lái)越小。這類(lèi)反應(yīng)達(dá)到平衡的時(shí)間很長(zhǎng)，理論上可以在任意時(shí)間段進(jìn)行監(jiān)測(cè)，但由于血清成份復(fù)雜，反應(yīng)剛啟動(dòng)時(shí)反應(yīng)較復(fù)雜，雜反應(yīng)較多，必須經(jīng)過(guò)一段延遲時(shí)間才能進(jìn)進(jìn)穩(wěn)定反應(yīng)期。
