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核酸提取儀是如何操作,檢測(cè)方法有哪些?
核酸提取儀是如何操作,檢測(cè)方法有哪些?
加入時(shí)間:2022-03-09 09:57:19 當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率:1180
春季到來(lái),病毒開(kāi)始活躍,導(dǎo)致疫情開(kāi)始起伏,因此,利用做核酸來(lái)排查出有異常的情況,真正做到有效率的預(yù)防。那么,核酸提取儀是如何進(jìn)行操作呢?有哪些檢測(cè)方法。
從核酸采集、轉(zhuǎn)運(yùn)、滅活、到提取在到檢測(cè),分別涉及的體外診斷設(shè)備分別由:一次性病毒采樣式子、一次性病毒采樣管、樣本保存液、核算提取試劑、核酸提取儀、RT-PCR檢測(cè)儀,其中核酸提取儀是應(yīng)用配套的核酸提取試劑來(lái)自動(dòng)完成樣本核酸提取工作的儀器,應(yīng)用在疾病控制中心、臨床疾病診斷、輸血安全、法醫(yī)學(xué)鑒定、環(huán)境微生物檢測(cè)、食品安全檢測(cè)、畜牧業(yè)和分子生物學(xué)研究等多種領(lǐng)域。 核酸的提取分別為DNA提取和RNA提取,二者的提取原理大致相同,簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)分為細(xì)胞或者組織的裂解和核酸純化兩大步驟。核酸提取純化方法常用的有酚/氯仿抽提法、離心柱法、磁珠法等。 1.酚/氯仿抽提法 乙烯氯仿提取DNA是利用酚是蛋白質(zhì)的變性劑,反復(fù)抽提,使蛋白質(zhì)變性,SDS將細(xì)胞膜裂解,在蛋白酶K、EDTA的存在下消化蛋白質(zhì)或多肽或小肽分子,變性降解核蛋白,使DNA從核蛋白中游離出來(lái)。 2.離心柱純化 離心柱結(jié)構(gòu)主要是特殊硅基質(zhì)吸附材料,能特異性吸附DNA,而RNA與蛋白質(zhì)則會(huì)穿過(guò)。該方法能選擇性地吸附核酸而不吸附蛋白質(zhì)及鹽,從而實(shí)現(xiàn)核酸與蛋白質(zhì)及鹽的分離,是目前試劑盒提取廣泛使用的方法。 3.磁珠法 磁珠法是一種固相載體可逆化固定(SPRI)的分離純化方法,主要原理為:在不同濃度的PEG中,會(huì)有不同片段大小的DNA吸附在磁珠的羧基修飾層上,這些DNA可以再溶解在水中,以此來(lái)洗脫回收。
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