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醫(yī)療動(dòng)態(tài)
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市場(chǎng)常規(guī)酶標(biāo)儀檢測(cè)原理細(xì)節(jié)分析
市場(chǎng)常規(guī)酶標(biāo)儀檢測(cè)原理細(xì)節(jié)分析
加入時(shí)間：2014-06-11 10:35:36 當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率：2041
酶標(biāo)儀采用的光通常是是電磁波，波長(zhǎng)100nm～400nm稱為紫外光，400nm～780nm之間的光可被人眼觀察到，大子780nm稱為紅外光。人們只所以能夠看到色彩，是因?yàn)楣庹丈涞轿矬w上被物體反射回來(lái)。綠色植物之所以是綠色，是因?yàn)橹参镂樟斯庵械募t色光譜。酶標(biāo)儀的檢測(cè)原理是在特定波長(zhǎng)下，檢測(cè)被測(cè)物的吸光值。
檢測(cè)單位：
光通過(guò)被檢測(cè)物，前后的能量差異即是被檢測(cè)物吸收掉的能量，特定波長(zhǎng)下，同一種被檢測(cè)物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
檢測(cè)單位用OD值表示， OD是optical delnsity(光密度)的縮寫(xiě)，表示被檢測(cè)物吸收掉的光密度， OD=1og(1/trans)，其中trans為檢測(cè)物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則，OD值與光強(qiáng)度成下述關(guān)系：
E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度，Ι0 為在檢測(cè)物之前的光強(qiáng)度，Ι為從被檢測(cè)物出來(lái)的光強(qiáng)度。
OD值由下述公式計(jì)算：
E=OD=C×D×E（C為檢測(cè)物的濃度、D為檢測(cè)物的厚度、E為摩爾因子）
在特定波長(zhǎng)下測(cè)定每一種物質(zhì)都有其特定的波長(zhǎng)，在此波長(zhǎng)下，此物質(zhì)能夠吸收最多的光能量。如果選擇其它的波長(zhǎng)段，就會(huì)造成檢測(cè)結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此，在測(cè)定檢測(cè)物時(shí)，我們選擇特定的波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè)，稱為測(cè)量波長(zhǎng)。
但是每一種物質(zhì)對(duì)光能量還存在一定的非特異性吸收，為了消除這種非特異性吸收，我們?cè)龠x取一個(gè)參照波長(zhǎng)，以消除這個(gè)不準(zhǔn)確性。在參照波長(zhǎng)下，檢測(cè)物光的吸收最小。檢測(cè)波長(zhǎng)和參照波長(zhǎng)的吸光值之差可以消除非特異性吸收。
Anthos 酶標(biāo)儀檢測(cè)值計(jì)算
醫(yī)療設(shè)備中的檢測(cè)器接收透過(guò)被檢測(cè)物的光能量，轉(zhuǎn)換成二進(jìn)位數(shù)字信號(hào)，最大為4095。儀器定義沒(méi)有光源下的透光值為 0%，沒(méi)有檢測(cè)物的透光值為100%。則實(shí)際檢測(cè)中，檢測(cè)物的透光值均在 0%一100%之間。透光值的計(jì)算如下：
T=(Meas—Min)/(Max—Min)
Anthos 酶標(biāo)儀的中心定位
儀器會(huì)自動(dòng)對(duì)酶標(biāo)孔進(jìn)行中心定位，中心定位是要消除酶標(biāo)孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來(lái)檢測(cè)的不準(zhǔn)確。在對(duì)每一個(gè)酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，儀器其實(shí)要進(jìn)行35個(gè)點(diǎn)的測(cè)量，選取最中間的5個(gè)點(diǎn)的均值為本孔的OD值。
由于有相當(dāng)多的因素會(huì)影響檢測(cè)的結(jié)果，如不同的酶標(biāo)板，檢測(cè)試劑的體積，都會(huì)造成OD值的不同，因此，只有使用同一酶標(biāo)板反應(yīng)的試劑檢測(cè)結(jié)果才能比較和分析。對(duì)結(jié)果的臨床解釋請(qǐng)依照試劑盒的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。酶標(biāo)儀的檢測(cè)原理。
