首頁
>
醫(yī)療動態(tài)
>
多功能酶標(biāo)儀如何進行靈敏度和正確度的監(jiān)測？
多功能酶標(biāo)儀如何進行靈敏度和正確度的監(jiān)測？
加入時間：2014-06-10 11:35:51 當(dāng)前新聞點擊率：3483
現(xiàn)階段的酶標(biāo)儀在我國各醫(yī)院及科研單位的應(yīng)用已經(jīng)非常廣泛，目前可用于多種疾病及物質(zhì)檢測，如三氯氰胺等。為有效保證檢測數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，醫(yī)療設(shè)備的靈敏度是非常重要的，那么多功能酶標(biāo)儀如何進行靈敏度和正確度的監(jiān)測？
方法：①靈敏度：精確配制6 ug/ml重鉻酸鉀（干燥）溶液（0.05 mo1／L硫酸溶解），加進200 ul重鉻酸鉀溶液于小孔杯中，以0.05 mo1／L硫酸溶液作空缺，于450 nm（參比波長650 nm）測定，其吸光度應(yīng)≥ 0.01 A。②正確度：正確配制：1mmo/L對硝基苯酚（提純品）水溶液，然后以10 mmo1／L氫氧化鈉溶液25 倍稀釋之，加進200 ul稀釋液于小孔杯中，以10 mmo1／L NaOH溶液作空缺，于405 nm（參比波長650 nm）檢測，其吸光度應(yīng)在0.4 A（0.395～0.408 A）左右。
醫(yī)療設(shè)備的靈敏度和正確度主要受兩個因素影響：一是濾光片波長的精度，二是檢測器的質(zhì)量。通常情況下，濾光片原因?qū)е聝x器的靈敏度和正確度下降比較輕易檢查；而檢測器質(zhì)量差異則不易被發(fā)現(xiàn)，因此我們采用上述兩種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液對儀器檢測器的質(zhì)量進行定期監(jiān)測，從而保證了儀器檢測結(jié)果的可靠性。對于儀器正確性的測定，我們采用了文獻報道的方法，經(jīng)過多次在不同型號儀器間進行反復(fù)測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該標(biāo)準(zhǔn)物溶液在450nm波優(yōu)點有一較為恒定的測定值，由于酶標(biāo)儀與其它分光光度計的光學(xué)原理不完全相同，故是否可以作為評價酶標(biāo)儀正確性的參考方法還有待同行進一步研究考證。
通道差與孔間差檢測
方法及其表達方式：①通道差檢測：取一只酶標(biāo)板小孔杯（杯底須光滑、透明、無劃痕、無污染）以酶標(biāo)板架作載體，分別加進三種不同濃度的甲基橙溶液 200 ul先后置于8個通道的相應(yīng)位置，蒸餾水調(diào)零，采用雙波長（測定波長490nm，參比波長630或650nm，以下均相同）連續(xù)測三次，觀察其不同通道之間丈量結(jié)果的一致性可用極差值來表示其通道差。②孔間差的丈量：選擇同一廠家、同一批號酶標(biāo)板條（8條共96 孔）分別加進200 ul甲基橙溶液（吸光度調(diào)至0.065～ 0.070 A）先后置于同一通道，蒸餾水調(diào)零，采用雙波長檢測，其誤差大小用±1.96s衡量。
理論解釋：為了進步酶標(biāo)儀的檢測速度，根據(jù) 96孔酶標(biāo)板的規(guī)格特點，目前大多數(shù)廠家的中、高檔酶標(biāo)儀均采用8通道的檢測器（部分中、低檔酶標(biāo)儀目前仍采用單通道）．因而它們每個通道的檢測能力是不盡相同的，它是儀器內(nèi)部的固有誤差，與所測溶液濃度成正相關(guān)（不同檢測器對不同濃度溶液的響應(yīng)能力不同），所以通道差是衡量酶標(biāo)儀性能良好與否的重要指標(biāo)之一；其衡量指標(biāo)用極差表示，這與廠家推薦的指標(biāo)是一致的；極差值越接近于零，通道差越小，說明同一樣品于不同通道檢測結(jié)果的一致性越好。
