血細胞分析儀發(fā)展中的技術進步
加入時間:2014-05-30 10:58:39 當前新聞點擊率:2045
隨著各種技術的不斷進步以及實驗室工作對醫(yī)療設備需求的不斷增加,血細胞分析儀的各項用途和用法也有不斷的進展,這首先體現(xiàn)在儀器應用的方便性\正確性和盡可能增加的參數(shù)上。其中以下技術的應用大大提高了醫(yī)院的診斷效率:
稀釋技術的進步
早期的儀器一般要求在測定前先進行人工稀釋,因此很多操縱要求直接取20~40ul的末梢血加到稀釋液中。白細胞稀釋比例多在1:251和1:501倍,紅細胞則需要進行二次稀釋,稀釋倍數(shù)在 6.25~25萬倍之間,然后再將稀釋好的標本放人計數(shù)杯內進行計數(shù),而且需要在白細胞稀釋懸液中加進溶血劑。由于人工稀釋費時費力且精確性差,隨后的一些血細胞計數(shù)儀增加配置了專用的稀釋器,專供該型號的儀器進行機外稀釋,這樣減少了人工稀釋帶來的誤差和麻煩,進步了效率。這類儀器的典型例子有國內應用非常普遍的Sy-amexF820型,此型號儀器到目前仍有市場需求并在廣泛使用。現(xiàn)代的血細胞分析儀則更加先進,已經將自動稀釋技術、自動進樣方式全部添加到儀器本體內,既進步了技術含量和取樣、稀釋的精確度,使得進樣的速度和可操縱性更加方便,同時使得檢測速度加快。
分析參數(shù)的增加
前面談到早期的血球計數(shù)儀僅能進行紅白細胞計數(shù),而且是需要通過切換分別進行紅白細胞計數(shù),所以將其稱為血細胞計數(shù)器是恰當?shù)?。由于血常?guī)檢驗對血紅蛋白測定的需求增加,沙利比色法精度和操縱不便不能滿足臨床需求,已有經單獨的血紅蛋白比色計配備,將加進專用的溶血劑后的樣本進行白細胞計數(shù)后再將其倒進血紅蛋白比色計,即可得到比色法測定的血紅蛋白結果。此時期國內使用最多的血細胞計數(shù)儀是CoulterZF型和血紅蛋白計。由于對血紅蛋白測定要求的增加,因此在儀器內增加一套比色裝置,就可方便的測定血紅蛋白。電阻法測定細胞數(shù)目的同時還可對細胞體積進行測定,因此對紅細胞均勻體積(MCV)、紅細胞壓積(HCT)、均勻紅細胞血紅蛋白量(MCH)、均勻紅細胞血紅蛋白濃度(MCHC)測定和計算也成為血球計數(shù)儀的標準參數(shù)。1975年日本東亞公司(Sysmex的前身)推出了包含以上7個參數(shù)的全自動血細胞計數(shù)儀器CC一710和 CC-720型。
血小板計數(shù)功能的增加
血小板是血細胞中最小的粒子,早期的血細胞計數(shù)儀均不包含血小板計數(shù)。60年代起國外開始研制血小板計數(shù)儀,70年代已經有比較成熟的產品,這類儀器一般需使用PRP血漿進行,即使用特殊的離心速度將紅細胞和白細胞進行沉淀,使上層血漿中盡量保存最為豐富的血小板,然后應用這種 PRP血漿進行血小板計數(shù),例如 SySmexPA-701型和CONTRAVI000型,此類儀器多配有專用PRP離心機。使用全血方式和水動力聚集方式計數(shù)血小板的儀器如 Clay-Adams的Ultra-Flo100型以及80年代后出現(xiàn)在我國的BayerS-810型血小板分析儀,該儀器設定了單獨血小板分析丈量通道,根據(jù)紅細胞和血小板體積的明顯差異將他們區(qū)分開,將血小板按體積大小劃分到64個通道,分別累加體積大小不同的血小板數(shù)目。它通過直接吸進稀釋好的血細胞懸液進行測定,除了給出血小板數(shù)目外,還提供了兩個新的參數(shù),均勻血小板體積(MPV)和血小板體積分在寬度(PDW)。在這之后血細胞分析儀將血小板計數(shù)這一重要功能合并到全血細胞計數(shù)(CBC)范圍內。
定量部的改進
為了正確進行細胞計數(shù),除了要正確稀釋血液外,對直接進進計數(shù)小孔的液體量也要進行定量控制,因此儀器對定量部的要求是非常嚴格的。在血細胞計數(shù)儀開始階段,人們設計了U型水銀管壓力計,通過水銀的重量和在兩個電極間的間隔來控制吸人的標本量。后來人們通過兩只光電管來了解液體通過一個固定間隔所需實的時間和容積來控制標本的吸進量,還有一些公司設計并使用了微量注射器技術以及浮球定量技術來控制計數(shù)樣本的量。最新的光電計時容量控制技術控制標本進進計數(shù)區(qū)的量,可以使得進進計數(shù)區(qū)域的細胞懸液定量更加正確和無污染,同時還可判定小孔是否出現(xiàn)堵塞或半堵塞題目,以便于維護。
自動取樣技術
由于儀器需要對全血進行自動取樣和稀釋,因此取樣量也同樣需要精確控制。最初的儀器是需要進行手工取樣和稀釋的,后來逐漸有了外置式專用取樣稀釋器。再后來儀器內部設置了內置式負壓取樣稀釋器,根據(jù)負壓量的大小來吸取血液樣品,這對控制負壓的精確度要求很高,此外還有微量注射器取樣技術,依靠光電管控制血液取樣量的技術等。目前以為采用旋轉閥取樣技術是比較精確的方法,旋轉閥內部有多個按一定體積設計的小孔,當血液進進后,旋轉閥從吸進的小孔轉向排出的小孔,此時血液不能再進進,而孔內保存的固定量的血液進進儀器的稀釋部,然后清洗,再進進下一次循環(huán)。