|
首頁(yè)
>
醫(yī)療動(dòng)態(tài)
>
生化分析儀酶測(cè)試不準(zhǔn)確原因有哪些
生化分析儀酶測(cè)試不準(zhǔn)確原因有哪些
加入時(shí)間:2014-04-24 11:17:43 當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率:2460
在生化分析的檢測(cè)測(cè)量中,酶的測(cè)定比較復(fù)雜,要求條件較高,測(cè)試比較困難。一般全自動(dòng)生化分析儀只要酶的測(cè)定準(zhǔn)確,重復(fù)性好,其他項(xiàng)目的測(cè)定一般沒(méi)有問(wèn)題?,F(xiàn)就全自動(dòng)生化分析儀酶分析中常見(jiàn)的測(cè)試不準(zhǔn)確、重復(fù)性差等原因來(lái)進(jìn)行分析,為使用者和維修工程師參考。 全自動(dòng)生化分析儀酶的測(cè)定一般用動(dòng)力學(xué)法進(jìn)行測(cè)試,其原理是在酶反應(yīng)的最適條件下,用物理、化學(xué)或酶促反應(yīng)的分析方法,在反應(yīng)速度恒定期(零級(jí)反應(yīng)期)來(lái)連續(xù)觀察和記錄一定反應(yīng)時(shí)間內(nèi)底物或產(chǎn)物量的變化,以單位時(shí)間酶反應(yīng)初速度計(jì)算出酶活力的大小和代謝物的濃度。 酶的測(cè)試結(jié)果與以下幾點(diǎn)有關(guān): (1)340nm為波長(zhǎng)低端,能量較低,同時(shí)340nm濾光片使用較多,易老化。所以,波長(zhǎng)漂移不準(zhǔn),半寬度變化都會(huì)影響測(cè)量的準(zhǔn)確度和重復(fù)性。 (2)動(dòng)態(tài)法測(cè)試有延遲時(shí)間、測(cè)試時(shí)間要求。延遲時(shí)間在動(dòng)態(tài)法中為預(yù)反應(yīng)時(shí)間,測(cè)試時(shí)間在動(dòng)態(tài)法中為測(cè)試的總時(shí)間。零級(jí)動(dòng)力學(xué)法是針對(duì)特定時(shí)間段而言的,酶反應(yīng)剛啟動(dòng)時(shí)反應(yīng)比較復(fù)雜,雜反應(yīng)較多,必須經(jīng)過(guò)一段延遲時(shí)間才能進(jìn)入穩(wěn)定反應(yīng)期,各試劑商對(duì)這兩段時(shí)間有嚴(yán)格規(guī)定。所以動(dòng)態(tài)法測(cè)試一般溫度在37℃,延遲時(shí)間不少于15s為好。 (3)對(duì)于參數(shù)的輸入應(yīng)按試劑要求輸入其給定值,一般試劑商在試劑盒說(shuō)明書(shū)中給予說(shuō)明。 (4)反應(yīng)溫度。 (5)測(cè)試空白要準(zhǔn)確。 (6)吸液量的大小直接影響交叉污染和測(cè)量的重復(fù)性,建議測(cè)試污染性大的物質(zhì)試劑量應(yīng)相應(yīng)增加。一般應(yīng)>400μl,一般項(xiàng)目為500μl即可。 (7)測(cè)試不準(zhǔn)確、重復(fù)性差從操作上看主要有:全自動(dòng)生化分析儀本身原因如比色杯中有氣泡;光源燈老化;光源電壓不穩(wěn);340nm濾光片性能變差,透射性變??;波長(zhǎng)不準(zhǔn)確等有關(guān)。一般檢查液路接口是否松動(dòng)漏氣,更換光源燈泡和340nm濾光片即可解決。至于電路問(wèn)題,加熱元件損壞,溫度不受控的問(wèn)題只能由工程師解決。 總之,酶的測(cè)定影響準(zhǔn)確度的因素很多,只要認(rèn)真操作,綜合分析影響測(cè)定的各項(xiàng)因素,認(rèn)真分析,酶測(cè)定的問(wèn)題不難解決的。根據(jù)普朗醫(yī)療多年的經(jīng)驗(yàn),只要試劑、樣品準(zhǔn)確,保存得當(dāng),樣品預(yù)處理仔細(xì),經(jīng)常維護(hù)、保養(yǎng)全自動(dòng)生化分析儀,認(rèn)真操作,問(wèn)題會(huì)自行解決。 |