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DNA測序的原理是什么
DNA測序的原理是什么
加入時間：2014-03-04 10:30:25 當前新聞點擊率：2882
DNA序列測定分手工測序和自動測序，手工測序包括雙脫氧鏈終止法和化學(xué)降解法。自動化測序?qū)嶋H上已成為當今DNA序列分析的主流。
DNA測序一般是采用毛細管電泳技術(shù)取代傳統(tǒng)的聚丙烯酰胺平板電泳，目前，類似南京普東興、華大基因、達安基因等國內(nèi)基因測序公司，應(yīng)用的都是專利的四色熒光染料標記的ddNTP(標記終止物法)，因此通過單引物PCR測序反應(yīng)，生成的PCR產(chǎn)物則是相差1個堿基的3'末端為4種不同熒光染料的單鏈DNA混合物，使得四種熒光染料的測序PCR產(chǎn)物可在一根毛細管內(nèi)電泳，從而避免了泳道間遷移率差異的影響，大大提高了測序的精確度。由于分子大小不同，在毛細管電泳中的遷移率也不同，當其通過毛細管讀數(shù)窗口段時，激光檢測器窗口中的CCD攝影機檢測器就可對熒光分子逐個進行檢測，激發(fā)的熒光經(jīng)光柵分光，以區(qū)分代表不同堿基信息的不同顏色的熒光，并在CCD攝影機上同步成像，分析軟件可自動將不同熒光轉(zhuǎn)變?yōu)镈NA序列，從而達到DNA測序的目的。分析結(jié)果能以凝膠電泳圖譜、熒光吸收峰圖或堿基排列順序等多種形式輸出。
DNA測序是近些年最常聽到的生物學(xué)詞匯，隨著基因測序技術(shù)的不斷發(fā)展許多測序公司也逐漸發(fā)展起來。DNA測序已經(jīng)不再是單一的只進行科學(xué)研究，離人們的生活也越來越近。 |
